
CL(EC 3.2.1.4)存在于細菌、真菌和動物體內,能夠催化羧甲基纖維素降解,是一類可廣泛應用于醫藥、食品、棉紡、環保及可再生資源利用等領域的酶制劑。本試劑盒采用蒽酮比色法測定CL催化羧甲基纖維素鈉降解產生的還原糖的含量,計算CL酶活。



酶標儀或可見分光光度計(能測620nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿,可調節式移液槍及槍頭
制冰機,離心機,水浴鍋
去離子水,濃硫酸
勻漿器
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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