
β-葡萄糖苷酶(β-D-Glucosidase,EC3.2.1.21),別名纖維二糖酶(cellobias,CB或β-G)、龍膽二糖酶和苦杏仁苷酶。它屬于纖維素酶類,是纖維素分解酶系中的重要組成成分,能夠催化β-糖苷鍵水解,同時(shí)釋放出β-D-葡萄糖和相應(yīng)的配基。β-GC廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,在植物的種子和微生物中尤為普遍,具有多方面生理作用:在纖維素的糖化作用中,β-GC負(fù)責(zé)進(jìn)一步水解纖維素二糖和纖維素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯類香氣前驅(qū)體,使糖苷鍵合態(tài)變成游離態(tài),從而產(chǎn)生香味。β-GC能夠水解植物體內(nèi)野黑櫻苷,釋放HCN,從而防止昆蟲取食。本試劑盒提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色法,用于分析各種生物樣品中β-GC的活性。其原理是β-GC分解對(duì)-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯酚,后者在400nm有大吸收峰,通過測(cè)定吸光值升高速率來計(jì)算β-GC活性。



酶標(biāo)儀或可見光分光光度計(jì)(能測(cè)400nm處的吸光度)及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
離心機(jī)、制冰機(jī)
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
更新中...
答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個(gè)修飾位點(diǎn),本身可以呈現(xiàn)多條帶,建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析,獲得蛋白序列的修飾位點(diǎn)信息,通過去修飾確定蛋白實(shí)際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時(shí)在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強(qiáng),建議使用特異性強(qiáng)的抗體;
5、抗體孵育時(shí)間過久,建議減少抗體孵育時(shí)間;
6、二抗與抗原有交叉反應(yīng),建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強(qiáng)度;
8、底物顯色與曝光時(shí)間過長(zhǎng),建議縮短顯色及曝光的時(shí)間。
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