糖類物質(zhì)是構(gòu)成動(dòng)植物體的重要成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)。總糖主要指具有還原性的葡萄糖、果糖、乳糖，以及在測定條件下能水解為還原性單糖的蔗糖、麥芽糖和可能部分水解的淀粉。本試劑盒可檢測各種生物樣本中總糖含量，其原理是通過將總糖水解為還原糖，還原糖在堿性條件下與DNS試劑共熱后還原DNS生成氨基化合物，在堿性溶液中呈紅棕色，在540nm有特征吸收峰；在一定的濃度范圍內(nèi)，還原糖含量與540nm吸光度成線性關(guān)系，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可計(jì)算出樣品中總糖含量。
酶標(biāo)儀或可見分光光度計(jì)（能測540nm處的吸光度）以及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
低溫離心機(jī)
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個(gè)修飾位點(diǎn)，本身可以呈現(xiàn)多條帶，建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析，獲得蛋白序列的修飾位點(diǎn)信息，通過去修飾確定蛋白實(shí)際大小；
2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時(shí)在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強(qiáng)，建議使用特異性強(qiáng)的抗體；
5、抗體孵育時(shí)間過久，建議減少抗體孵育時(shí)間；
6、二抗與抗原有交叉反應(yīng)，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強(qiáng)度；
8、底物顯色與曝光時(shí)間過長，建議縮短顯色及曝光的時(shí)間。
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