
Cx(EC3.2.1.4)存在于細菌、真菌和動物體內,是纖維素酶系的組份之一,Cx主要作用于非晶態纖維素和水溶性纖維素衍生物,隨機水解糖苷鍵,將其分解成葡萄糖、纖維二糖、纖維三糖和其他寡聚體。本試劑盒提供了一種簡單易用的比色法,用于分析生物樣品中Cx的活性。其原理是Cx可催化羧甲基纖維素鈉降解產生還原糖,通過3,5-二硝基水楊酸法測定還原糖生成速率來計算其酶活性。



酶標儀或可見光分光光度計(能測540nm處的吸光度)及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
離心機、制冰機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
更新中
答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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