
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括丙二醛(MDA)。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質(zhì)過氧化的水平。脂質(zhì)過氧化可能導(dǎo)致許多疾病的發(fā)生,包括動脈粥樣硬化、糖尿病和阿爾茨海默癥。本試劑盒為檢測各種樣品中的丙二醛提供了一種方便的工具。丙二醛(MDA)在酸性和高溫條件下,可以與硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成棕紅色的三甲川(3,5,5-三甲基惡唑-2,4-二酮),其大吸收波長在532nm,進(jìn)行比色后可估測樣本中MDA的含量。同時測定600nm下的吸光度,主要是消除蔗糖的干擾,利用532nm與600nm下的吸光度的差值,計算 MDA 的含量。



酶標(biāo)儀或可見分光光度計(能測532nm和600nm處的吸光度)及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
離心機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
10kDa MW 超濾管(可選)
1. Wei Zhao, La Zhang, Jiao Guo, Qing Xu, Intelligent Nano-Cage for Precision Delivery of CRISPR-Cas9 and ACC Inhibitors to Enhance Antitumor Cascade Therapy Through Lipid Metabolism Disruption. (IF 19)
通常可以按比例縮小,如說明書中是約0.1g組織加1ml提取液,可以等比例縮小,如0.05g組織加0.5ml提取液提取。后續(xù)操作不變。此外,對于數(shù)量少、酶活性低的樣品,一方面可以減少提取液體積,另一方面還可以延長反應(yīng)時間。
生化試劑盒初一般是采用分光光度法,用分光光度計測量吸光度。微量法是隨著酶標(biāo)儀和微孔板的普及,改用酶標(biāo)儀和酶標(biāo)板測量吸光度。除了儀器不同以外,主要差別是反應(yīng)體系更小,一般不超過250ul,計算公式的系數(shù)會有一定變化。
d:由比色皿光徑,1cm改為96孔板直徑,0.5 cm(也有0.6cm的)
但對于標(biāo)明只用分光光度法的試劑盒,不建議使用酶標(biāo)儀進(jìn)行酶活性測定。非要用酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測,一定要按照說明書將反應(yīng)體系縮小至250微升左右,加樣表中各試劑體積一定要按照比例縮小。不過,因為初研發(fā)時是按照分光光度法進(jìn)行設(shè)計和調(diào)整的,用戶改變測定儀器后,我們不保證能夠取得好的結(jié)果。
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