谷胱甘肽過氧化物酶（GPX）是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)中催化還原型谷胱甘肽（GSH）氧化的主要酶之一。GPX不僅能夠特異地催化還原型谷胱甘肽與活性氧（ROS）反應，生成氧化型谷胱甘肽GSSG，從而保護生物膜免受ROS的損害，維持細胞的正常功能；而且具有保護肝臟、提高機體免疫力、拮抗有害金屬離子對機體的傷害和增加機體抗輻射等能力。GPX的活性中心是硒半胱氨酸，硒是GPX的必需部分，測定GPX的活力可以作為衡量機體硒水平的一項生化指標。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法，用于檢測生物樣本，如血清（漿）、動植物組織、細胞、細菌樣本中GPX的活性。GPX催化H2O2氧化GSH，產(chǎn)生GSSG；谷胱甘肽還原酶（GR）催化NADPH還原GSSG，再生GSH，同時NADPH氧化生成NADP+；NADPH在340nm有特征吸收峰，而NADP+沒有；通過測定340nm光吸收減少速率來計算 GPX 活性。
酶標儀或紫外分光光度計（能測340 nm處的吸光度）
96孔UV微孔板或微量石英比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
恒溫箱、制冰機、低溫離心機
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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可能的原因有：
1.儀器校準不當。
2.檢測波長設置錯誤。
3.反應孔中有氣泡或雜質(zhì)。
通常可以按比例縮小，如說明書中是約0.1g組織加1ml提取液，可以等比例縮小，如0.05g組織加0.5ml提取液提取。后續(xù)操作不變。此外，對于數(shù)量少、酶活性低的樣品，一方面可以減少提取液體積，另一方面還可以延長反應時間。
1. 樣品盡可能液氮速凍后保存在-80℃冰箱中，以減少酶活性變化。粗酶液提取全程應該保持低溫，包括樣品稱量應該迅速完成，粗酶液提取應該在冰浴中進行，離心應該在4℃左右進行，測定過程中粗酶液應該保存在冰浴中。此外，粗酶液提取后應該盡快完成測定，通常不可以留到第二天測定。
2. 在對樣本進行提取時，加完提取液好不要用液氮研磨，而且樣本不要反復凍融，這樣會破壞酶的活性。凍融會影響蛋白的三級結(jié)構(gòu)，對酶活性有一定影響，對于動植物組織，可以直接研磨，對于細胞或細菌之類的樣品，可以使用超聲波。
3. 提取要根據(jù)不同樣本特點進行，原則是提取充分和保持活性。對于有細胞壁的樣品，一定要注意破壁方法；對于分布于特定細胞器中的成分，原則上先分離該細胞器，然后再從收集的細胞器中進一步提取需要的成分。對于存在于膜上的成分，要注意如何分離，去垢劑的使用要小心，以避免酶失活。使用超聲波破碎，一定要防止溫度升高導致失活。特殊樣品可以查閱相關文獻，參考前人提取方法，或者咨詢我們的研發(fā)專家。
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