
谷胱甘肽是甘氨酸、谷氨酸和半胱氨酸組成的天然三肽。在紅細(xì)胞中,還原型谷胱甘肽是維持血紅蛋白處于還原狀態(tài)的關(guān)鍵,保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。谷胱甘肽有還原型(GSH)和氧化型(GSSG)兩種形態(tài),氧化型谷胱甘肽(GSSG)是谷胱甘肽的氧化形式,又稱為二硫代谷胱甘肽,是兩分子的谷胱甘肽氧化而成。GSSG會被谷胱甘肽還原酶還原成GSH,因此機體中大多數(shù)是以還原型形式存在。還原型谷胱甘肽是絕大多數(shù)活細(xì)胞中巰基的主要來源,對于維持蛋白質(zhì)中巰基適當(dāng)?shù)难趸€原狀態(tài)有重要作用,并且是動物細(xì)胞中關(guān)鍵的抗氧化劑。
測定細(xì)胞內(nèi) GSH 和 GSSG含量以及 GSH/GSSG 比值,能夠很好地反映細(xì)胞所處的氧化還原狀態(tài),也是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的主要指標(biāo)之一。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法檢測各種生物樣本中GSH和GSSG的含量。其原理是GSH能和5,5'-二硫代-雙-(2-硝基苯甲酸)(5,5'-Dithiobis-2-Nitrobenoicacid,DTNB)反應(yīng)生成2-硝基-5-巰基苯甲酸,該物質(zhì)為黃色,在412nm波長處具有大光吸收,來測定樣本中GSH的含量。
通過2-乙烯吡啶抑制樣品中原有的還原型谷胱甘肽,然后利用谷胱甘肽還原酶(Glutathione reductase,GR)將GSSG還原為GSH,借此測定氧化型谷胱甘肽的含量。



酶標(biāo)儀或可見光分光光度計(能測412nm處的吸光度)及恒溫箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
制冰機、低溫離心機、去離子水、勻漿器(如果是組織樣本)
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可能的原因有:
1.儀器校準(zhǔn)不當(dāng)。
2.檢測波長設(shè)置錯誤。
3.反應(yīng)孔中有氣泡或雜質(zhì)。
可能的原因有:
1.反應(yīng)溫度過高或過低。
2.試劑濃度不合適。
3.樣本中目標(biāo)物質(zhì)濃度異常。
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