
谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS;EC 6.3.1.2)是一種控制氮代謝的酶,主要存在于植物中,是生物體內氨同化的關鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲存和運輸形式。在高等植物的研究中,GS也常被定義為植物氨同化所必需的酶,人谷氨酰胺合成酶叫做hGS。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法檢測生物樣本中谷氨酰胺合成酶(GS)的活性水平。其原理是GS在ATP和Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進一步轉化為γ─谷氨酰基異羥肟酸,在酸性條件下與鐵形成的絡合物在540nm處有大吸收峰,于540nm測定吸光度,即可計算谷氨酰胺合成酶(GS)活力。



酶標儀或可見分光光度計(能測540nm處的吸光度)及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
恒溫箱、低溫離心機、制冰機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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可能的原因有:
1.儀器校準不當。
2.檢測波長設置錯誤。
3.反應孔中有氣泡或雜質。
1)對照的設置對于測定結果的可靠性影響很大,尤其是待測液中含有與測定原理中擬直接檢測的產物一樣的物質時。通過設置對照,不僅可以排除本底的影響,而且可以排除其它一些未知的復雜影響,保證測定結果可靠。
(2)首先考慮的是保證測定結果可靠。因此,有些試劑盒只設空白對照,但是有些試劑盒每個樣品都設對照。其中后者是根據反應原理,為了排除可能的復雜影響。
關于設置樣本對照是否造成浪費。首先必須要保證測定結果可靠,因為如果測定結果不可靠,就不可能得到正確結論,那么所有的研究投入,包括前期的樣品培養與處理、購買試劑盒的費用和用戶的時間與精力,都會浪費。為此,我們精心權衡,在必要時每個樣品都設對照。
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