乙酰膽堿酯酶（AchE）屬于絲氨酸水解酶，廣泛存在于各種動物組織和血清中。AchE催化乙酰膽堿（Ach）水解，在神經傳導調節中起重要作用。本試劑盒提供了一種簡便的檢測方法可檢測生物體內AchE活性，其原理是：AchE催化Ach水解生成膽堿，膽堿與二硫對硝基苯甲酸（DTNB）作用生成5-巰基-硝基苯甲酸（TNB）；TNB在412nm處有吸收峰，通過測定412nm吸光度增加速率，計算AchE活性。
酶標儀或可見光分光光度計（能測412nm處的吸光度）
恒溫箱、制冰機、低溫離心機
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
1. 實驗過程中請穿戴實驗服、口罩和乳膠手套。請按照生物實驗室的國家安全規定進行實驗，尤其是在檢測血樣或其他體液時。
2. 本試劑盒僅用于實驗室科學研究，如果本試劑盒用于臨床診斷或任何其他用途，我們將不對任何后果負責。
3. 本試劑盒應在有效期內使用，并請嚴格按照說明書進行存儲。
4. 不同批次號、不同廠家之間的組分不要混用；否則，可能導致結果異常。
5. 勤換吸頭，避免各組分之間的交叉污染。
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通?？梢园幢壤s小，如說明書中是約0.1g組織加1ml提取液，可以等比例縮小，如0.05g組織加0.5ml提取液提取。后續操作不變。此外，對于數量少、酶活性低的樣品，一方面可以減少提取液體積，另一方面還可以延長反應時間。
1. 樣品盡可能液氮速凍后保存在-80℃冰箱中，以減少酶活性變化。粗酶液提取全程應該保持低溫，包括樣品稱量應該迅速完成，粗酶液提取應該在冰浴中進行，離心應該在4℃左右進行，測定過程中粗酶液應該保存在冰浴中。此外，粗酶液提取后應該盡快完成測定，通常不可以留到第二天測定。
2. 在對樣本進行提取時，加完提取液好不要用液氮研磨，而且樣本不要反復凍融，這樣會破壞酶的活性。凍融會影響蛋白的三級結構，對酶活性有一定影響，對于動植物組織，可以直接研磨，對于細胞或細菌之類的樣品，可以使用超聲波。
3. 提取要根據不同樣本特點進行，原則是提取充分和保持活性。對于有細胞壁的樣品，一定要注意破壁方法；對于分布于特定細胞器中的成分，原則上先分離該細胞器，然后再從收集的細胞器中進一步提取需要的成分。對于存在于膜上的成分，要注意如何分離，去垢劑的使用要小心，以避免酶失活。使用超聲波破碎，一定要防止溫度升高導致失活。特殊樣品可以查閱相關文獻，參考前人提取方法，或者咨詢我們的研發專家。
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