
高密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,運載周圍組織中的膽固醇,再轉化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出,是一種抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,是冠心病的保護因子,俗稱“血管清道夫”,對冠心病的臨床診斷是一個重要的參考指標。本試劑盒可檢測生物體內HDL-C含量。其原理是:用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固醇,利用膽固醇酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇(FC)和游離脂肪酸(FFA),從而把膽固醇酯轉化為FC;進一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和 H2O2;再利用過氧化物酶催化 H2O2氧化 4-氨基安替比林和酚,生成紅色醌類化合物;在500 nm有特征吸收峰。



酶標儀或可見分光光度計(能測500nm處的吸光度)
恒溫箱、制冰機、低溫離心機
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
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答:可能的原因有:
1、膠濃度不對,不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差,可以調整濃度;
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度,延長孵育時間;
3、酶失活,建議直接將酶和底物進行混合,如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物;
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體,建議查詢相關文獻確定;
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建議設置陽性對照比對結果,增加標本上樣量。
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