一氧化氮（Nitric Oxide，NO）是一種極不穩定的生物自由基，分子小，結構簡單，可快速透過生物膜擴散，作為一種新型的生物信使分子，在細胞間及細胞內傳遞信號，在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。其廣泛分布于生物體內神經、循環、呼吸、消化、泌尿生殖等系統中，特別是神經組織中較豐富。NO易被氧化成亞硝酸鹽和硝酸鹽，因此，通常要測定亞硝酸鹽和硝酸鹽的總量來推算出總的一氧化氮的量。本試劑盒采用改進的格里斯法將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽后，即可準確測定NO的生成量。格里斯分析的機理概括為重氮類之間的偶氮耦合，重氮類是由磺胺和 NO2-和 N-（1-萘基）乙二胺二鹽酸鹽產生的，產物在540nm處有特征吸收峰，測定其吸光值，可以計算NO含量。
酶標儀或分光光度計（能測 540nm處的吸光值）及恒溫培養箱
96孔板或微量比色皿、可調節式移液槍及槍頭
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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可能的原因有：
1.儀器校準不當。
2.檢測波長設置錯誤。
3.反應孔中有氣泡或雜質。
生化試劑盒初一般是采用分光光度法，用分光光度計測量吸光度。微量法是隨著酶標儀和微孔板的普及，改用酶標儀和酶標板測量吸光度。除了儀器不同以外，主要差別是反應體系更小，一般不超過250ul，計算公式的系數會有一定變化。
d：由比色皿光徑，1cm改為96孔板直徑，0.5 cm（也有0.6cm的）
但對于標明只用分光光度法的試劑盒，不建議使用酶標儀進行酶活性測定。非要用酶標儀進行檢測，一定要按照說明書將反應體系縮小至250微升左右，加樣表中各試劑體積一定要按照比例縮小。不過，因為初研發時是按照分光光度法進行設計和調整的，用戶改變測定儀器后，我們不保證能夠取得好的結果。
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