丙酮酸（PA）通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝，起著重要的樞紐作用。本試劑盒提供了一種簡單易用的比色法，用于分析各種生物樣本中的丙酮酸含量，其原理是樣品中丙酮酸與2,4-二硝基苯肼反應，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在堿性溶液中呈紅色，該紅色化合物在520nm處有大吸收峰。在一定的濃度范圍內，丙酮酸含量與520nm吸光度成線性關系，根據標準曲線，即可計算出樣品中丙酮酸含量。
酶標儀或可見分光光度計（能檢測520nm）
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
離心機
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：可能的原因有：
1、膜沒有完全均勻濕透,建議 使用100% methanol浸透膜；
2、洗膜不充分，可以增加洗液體積和洗滌次數；
3、電極不平衡或者加樣位置偏斜，可以調整電極和加樣；
4、封閉物用量不足，可以提高封閉物濃度，孵育時保證封閉液完全浸沒轉印膜；
5、封閉物使用不當，比如檢測生物素標記的蛋白時不可用脫脂奶粉封閉；
6、封閉時間不夠，一般情況下室溫37度封閉1小時以上或者4度封閉過夜；
7、抗體非特異性結合，可以降低抗體濃度，減少孵育時間；
8、一抗稀釋度不適宜，可以對抗體進行滴度測試，選擇適宜的抗體稀釋度；
9、一抗孵育的溫度偏高，建議4℃結合過夜；
10、抗體濃度過高或洗滌不夠，建議降低抗體濃度，增加洗滌次數和時間；
11、化學顯色底物過多，建議按說明書加入適量的顯色底物。
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