中性蛋白酶（Neutral protease, NP）在一定的溫度和中性pH條件下，催化水解蛋白質(zhì)。由于其安全無(wú)毒、水解能力強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn)，中性蛋白酶常用于食品、飼料、化妝品和營(yíng)養(yǎng)保健品生產(chǎn)。本試劑盒提供了一種簡(jiǎn)單、快速的中性蛋白酶檢測(cè)方法，其檢測(cè)原理是：中性條件下，NP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；在680nm有特征吸收峰。通過(guò)測(cè)定其吸光度增加，來(lái)計(jì)算NP活性。
酶標(biāo)儀或可見(jiàn)光分光光度計(jì)（能測(cè)680nm處的吸光度）
水浴鍋、制冰機(jī)、低溫離心機(jī)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
去離子水
勻漿器
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答：可能的原因有：
1、膠濃度不對(duì)，不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差，可以調(diào)整濃度；
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度，延長(zhǎng)孵育時(shí)間；
3、酶失活，建議直接將酶和底物進(jìn)行混合，如果不顯色則說(shuō)明酶失活了。選擇在有效期內(nèi)、有活性的酶聯(lián)物；
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體，建議查詢相關(guān)文獻(xiàn)確定；
5、標(biāo)本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低，建議設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照比對(duì)結(jié)果，增加標(biāo)本上樣量。
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