抗氧化劑在防止自由基和其他潛在有毒氧化物質(zhì)的形成和清除方面發(fā)揮著重要作用。總抗氧化狀態(tài)（TAS）指抗氧化系統(tǒng)內(nèi)抗氧化劑清除自由基產(chǎn)生抗氧化作用的能力。正常情況下，體內(nèi)的抗氧化系統(tǒng)不斷清除過(guò)多的自由基，使人體內(nèi)總抗氧化能力與自由基產(chǎn)生保持平衡。總抗氧化能力降低，代表機(jī)體清除自由基的能力減弱。總抗氧化能力的測(cè)定可以通告機(jī)體對(duì)自由基的平衡能力，有利于掌握機(jī)體的防御能力。因此檢測(cè)體內(nèi)總抗氧化能力就顯得異常重要。本試劑盒提供了一種簡(jiǎn)便的比色測(cè)定法，用于測(cè)定樣本中的總抗氧化能力。其原理是在酸性環(huán)境下，抗氧化物質(zhì)還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ，在593nm測(cè)定Fe2+-TPTZ的含量，即可獲得樣品中的總抗氧化能力。
試劑盒組分 | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存條件 | |
48T | 96T | ||
提取液 | 60mL | 120mL | 4℃保存 |
試劑一 | 10mL | 20mL | 4℃保存 |
試劑二 | 1mL | 2mL | -20℃避光保存 |
試劑三 | 1mL | 2mL | -20℃避光保存 |
陽(yáng)性對(duì)照 | 1mg | 1mg | 4℃避光保存 |
酶標(biāo)儀或可見(jiàn)光分光光度計(jì)（能測(cè)593nm處的吸光度）
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
低溫離心機(jī)、制冰機(jī)
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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通常可以按比例縮小，如說(shuō)明書(shū)中是約0.1g組織加1ml提取液，可以等比例縮小，如0.05g組織加0.5ml提取液提取。后續(xù)操作不變。此外，對(duì)于數(shù)量少、酶活性低的樣品，一方面可以減少提取液體積，另一方面還可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間。
生化試劑盒初一般是采用分光光度法，用分光光度計(jì)測(cè)量吸光度。微量法是隨著酶標(biāo)儀和微孔板的普及，改用酶標(biāo)儀和酶標(biāo)板測(cè)量吸光度。除了儀器不同以外，主要差別是反應(yīng)體系更小，一般不超過(guò)250ul，計(jì)算公式的系數(shù)會(huì)有一定變化。
d：由比色皿光徑，1cm改為96孔板直徑，0.5 cm（也有0.6cm的）
但對(duì)于標(biāo)明只用分光光度法的試劑盒，不建議使用酶標(biāo)儀進(jìn)行酶活性測(cè)定。非要用酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)，一定要按照說(shuō)明書(shū)將反應(yīng)體系縮小至250微升左右，加樣表中各試劑體積一定要按照比例縮小。不過(guò)，因?yàn)槌跹邪l(fā)時(shí)是按照分光光度法進(jìn)行設(shè)計(jì)和調(diào)整的，用戶改變測(cè)定儀器后，我們不保證能夠取得好的結(jié)果。
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