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本產品適用于從大腸桿菌等細菌中提取高純度的質粒DNA，利用經典的堿裂解法，使用了高載量的硅基提取柱，具有操作簡單，耗時短以及質粒得率高等優點。
本試劑盒提取的質粒可用于下游的酶切、PCR擴增、DNA測序、轉化、體外轉錄翻譯等，但不能直接用于細胞轉染。如需轉染級質粒DNA，請使用本公司的無內毒素質粒提取試劑盒(PM0105)。

準備工作：次使用時，在Buffer P1中加入1/100體積的RNase A，之后于2-8℃保存。在Buffer PE中加入相應體積的乙醇。
1. 取4-6ml菌液，12000 rpm離心5min收集菌體。
2. 加入250μl Buffer P1，吹打重懸菌體。
3. 加入250μl Buffer P2，蓋上離心管蓋，上下顛倒4-6次。(此時細菌懸液會變澄清)
4. 加入350μl Buffer N3，上下劇烈顛倒4-6次。(此步會出現白色絮狀沉淀)
5. 12000 rpm 離心10min。(如上清液中仍有細菌碎片，可再次離心)
6. 將提取柱置于收集管中，小心吸取上清液(盡量不要吸到沉淀物)加入到提取柱中，離心1min，然后棄去收集管中的液體。
7. 可選步驟：將提取柱重新放在收集管中，在提取柱加入500μl Buffer PB，離心1min，棄去收集管中的液體。(E.coli JM109、BL21HB101、ET12567等endA+宿主菌推薦此步驟，有利于降低質粒中蛋白質殘留。E.coli 5α、TOP10等endA-宿主菌此步可省略。)
8. 加入750μl Buffer PE，離心30s，棄去接收管中的液體。
9. 將提取柱重新放在收集管中，再次離心1min。
10. 將提取柱置于干凈的1.5ml離心管中，在提取柱中加入40-60μl Buffer EB或水(盡量滴加在膜中央)，靜置1min，之后 12000rpm 離心1min。(Buffer EB 或水可事先在60℃水浴預熱，以增加洗脫效率。)

1、產品(除添加RNase A后的Buffer P1)可在15-25℃條件下保存15個月以上。添加RNase A后的Buffer P1在2-8℃條件下可穩定保存6個月以上。
2、次使用時請按照試劑瓶上說明在Buffer PE中加入乙醇。
3、Buffer P2和Buffer N3含有SDS等成分，在低溫下出現結晶屬正常現象，如出現混濁或結晶，在37℃孵育5-10min即可恢復澄清，不影響使用。實驗過程中請戴手套，請勿用手直接接觸Buffer P2和Buffer N3。
4、高拷貝質粒(如pUC、pET系列)的得率高可達30ug以上。中低拷貝質粒得率在3-20ug之間。
5、對于低拷貝(如pACYC、pSC101衍生質粒)或大質粒(>10kb)提取，應加大起始菌量，使用5-10ml過夜培養物，同時按照比例增加 Buffer P1、P2、N3的使用量。
6、Buffer EB可在使用前在60℃水浴預熱，以增加洗脫效率。
7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
8、本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。