
與原始的隨機交配3T3和近交系BALB/c3T3建株方法一樣,NIH/3T3,是從NIH Swiss小鼠胚胎培養物中建立的高度接觸抑制的連續細胞株。為了培育在形態學特征上更適合于進行轉化分析的亞株,建立的NIH/3T3細胞株又進行了五輪以上亞克隆。這株細胞對DNA轉化及轉染研究十分有用。檢測表明肢骨發育畸形病毒(鼠痘)陰性。

1.來源:小鼠胚胎
2.形態:成纖維細胞,貼壁生長
3.含量:>1x10^6 細胞數
4.規格:T25 瓶或者1mL凍存管包裝
5.用途:僅供科研使用。

干冰運輸及復蘇好存活細胞
1.1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
2.T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

1.收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2.請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10X,20x)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3. 貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4.備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養瓶1:2傳代。

1.準備DMEM基礎培養基86%、小牛血清10%、P/S青霉素-鏈霉素1%、MEM NEAA非必需氨基酸1%、Sodium Pyruvate丙酮酸鈉1%、GlutaMAX-1谷氨酰胺1%。
2.培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。2-3天換液一次。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
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答:可能的原因包括培養基質量、血清質量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有:
1. 使用高質量的培養基和血清,確保其無菌、無支原體污染,并保證在保質期內使用;
2. 培養箱溫度和氣體比例要保持穩定,定期校準;
3. 每天檢查并記錄細胞培養的環境參數,如溫度、pH值、氣體比例等,以便及時發現問題;
4. 定期更換培養基,保持細胞營養充足;
5. 對于生長緩慢的細胞株,可以嘗試進行克隆篩選或更換培養基。
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