
HOS 細(xì)胞是從一名 13 歲的白人女性的骨肉瘤組織中分離建立的;HOS 細(xì)胞表現(xiàn)為扁平形態(tài)、低飽和密度、軟瓊脂中的低克隆形成率和對(duì)化合物及病毒感染的敏感性。

1) 來(lái)源:骨;骨肉瘤
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣 多角形 單層貼壁生長(zhǎng) 背景干凈
3) 含量:>1x10^6 細(xì)胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞:
(1)1mL 凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收
到后-80 度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。(2)T25 瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?4 或 5X 顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各 2-3 張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在 37℃培養(yǎng)箱中放置 2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在 60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完全培養(yǎng)基 6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá) 70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 T25 培養(yǎng)瓶 1:2 傳代 。

1)準(zhǔn)備 MEM(含 NEAA)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;p/s 雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37 攝氏度,培養(yǎng)箱
濕度為 70%-80%。
3)凍存液:55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基,40%FBS,5%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配
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答:可能的原因包括培養(yǎng)基質(zhì)量、血清質(zhì)量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有:
1. 使用高質(zhì)量的培養(yǎng)基和血清,確保其無(wú)菌、無(wú)支原體污染,并保證在保質(zhì)期內(nèi)使用;
2. 培養(yǎng)箱溫度和氣體比例要保持穩(wěn)定,定期校準(zhǔn);
3. 每天檢查并記錄細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境參數(shù),如溫度、pH值、氣體比例等,以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題;
4. 定期更換培養(yǎng)基,保持細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)充足;
5. 對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞株,可以嘗試進(jìn)行克隆篩選或更換培養(yǎng)基。
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