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這是 D. Yaffe 和 O. Saxel 建立的小鼠成肌細(xì)胞株的亞克隆(由 H. Blau 等人構(gòu)建)。C2C12 細(xì)胞株分化很快，形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。用骨形成蛋白 2(BMP-2)處理，導(dǎo)致分化途徑從成肌細(xì)胞轉(zhuǎn)換成成骨細(xì)胞。檢測(cè)表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。

1） 來(lái)源：組織： 肌肉 品系：C3H 細(xì)胞類型： 成肌細(xì)胞

2） 形態(tài)：成肌細(xì)胞，貼壁生長(zhǎng)

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝

5） 用途：僅供科研使用。

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞：

（1）1mL 凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80 度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25 瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置約 2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?4 或 5X 顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各 2-3 張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在 37℃培養(yǎng)箱中放置 2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在 60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基 6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá) 70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 T25 培養(yǎng)瓶 1：2 傳代

1） 準(zhǔn)備 DMEM 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。C2C12 細(xì)胞生長(zhǎng)較快，培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞密度不可過(guò)高，否則容易分化

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37 攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。