蛋白質的磷酸化和去磷酸化控制了細胞分化、增殖、信號傳導和凋亡等過程，磷酸基團的共價結合可以改變蛋白的構象和配基的結合能力， 動物細胞或組織蛋白提取的過程中,磷酸化蛋白質容易被胞體和外源性磷酸酶降解。
磷酸酶抑制劑(50×)為多種磷酸酶抑制劑混合液，可有效抑制酪氨酸磷酸酶、絲氨酸磷酸酶、蘇氨酸磷酸酶、酸性和堿性磷酸酶等各種磷酸酶。適用于動物細胞或組織蛋白的提取，能大程度地保持蛋白質磷酸化，常用于動物細胞或組織中蛋白激酶活性和信號傳導的研究。該試劑僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。
按照緩沖液:磷酸酶抑制劑(50×)=49:1的比例，配制1×的含磷酸酶抑制劑的工作液，或者直接把磷酸酶抑制劑加入所需工作液中混勻即可。
盡量減少反復凍融的次數，以免失效。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現多條帶，建議查閱文獻或進行生物信息學分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大小；
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體；
5、抗體孵育時間過久，建議減少抗體孵育時間；
6、二抗與抗原有交叉反應，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質變性過程及強度；
8、底物顯色與曝光時間過長，建議縮短顯色及曝光的時間。
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