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細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后，會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link)，從而遮蔽樣品的抗原位點，導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱，甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。本抗原修復(fù)液采用了廣泛使用的EDTA，可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理，而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理。抗原修復(fù)會大大改善石蠟切片的免疫染色效果，但對于冰凍切片的染色效果很多文獻(xiàn)資料表明也有顯著改善。特別是當(dāng)冰凍切片免疫染色效果欠佳時，可以考慮嘗試進(jìn)行抗原修復(fù)。從原理上來看，無論冰凍切片還是細(xì)胞爬片等，只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品，進(jìn)行抗原修復(fù)都會有效去除蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。本產(chǎn)品特別適合用于石蠟切片，也可以用于冰凍切片等其它樣品。

1. 對于石蠟切片：

a. 脫蠟：切片在二甲苯中脫蠟5分鐘，再換用新鮮的二甲苯脫蠟，共用二甲苯脫蠟3次。無水乙醇5分鐘，兩次。90%乙醇5分鐘，兩次，70%乙醇5分鐘，一次。蒸餾水5分鐘，兩次。

b.抗原修復(fù)：用重蒸水或Milli-Q水將本抗原修復(fù)液(50X)稀釋50倍，配制成抗原修復(fù)液(1X)，例如1ml本抗原修復(fù)液(50X)加入49ml重蒸水或Milli-Q水，混合均勻，即得50ml抗原修復(fù)液(1X)。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1X)中，95-100℃加熱約15分鐘(加熱時間可以控制在10-20分鐘內(nèi)，佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1X)使用前需預(yù)熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20-30分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次，每次3-5分鐘。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

2. 對于冰凍切片：

用免疫染色洗滌液洗滌切片5分鐘。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1X)中，95-100℃加熱約15分鐘(加熱時間可以控制在10-20分鐘內(nèi)，佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1X)使用前需預(yù)熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋，也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱，需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20-30分鐘內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次，每次3-5分鐘。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。

3. 對于其它樣品的抗原修復(fù)，可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進(jìn)行。

1.抗原修復(fù)過程可以使用染色缸和染色架或郵寄夾進(jìn)行操作。塑料染色缸、染色架和郵寄夾可以很好地耐受沸水浴，而玻璃染色缸需避免驟冷驟熱導(dǎo)致的玻璃破碎。

2.本抗原修復(fù)液使用前必須用重蒸水或Milli-Q水稀釋50倍，配制成抗原修復(fù)液(1X)

3. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放

于普通住宅內(nèi)。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。