本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法。用抗大鼠ET-1抗體包被于酶標板上，實驗時樣品（或標準品）中的大鼠ET-1 會與包被抗體結合。后依次加入生物素化的抗大鼠 ET-1 抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素，抗大鼠 ET-1 抗體與結合在包被抗體上的大鼠ET-1結合，生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB 在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD 值，ET-1濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中ET-1的濃度。
酶標儀（能測 450nm 處的吸光度）
多通道移液器或自動洗板機
恒溫箱、低溫離心機
可調節式移液槍及槍頭
去離子水
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可能原因 解決措施是
1，標準品稀釋不正確。 確保標準品按照推薦方法溶解和稀釋。
2，移液不準確。 定期校準移液器并檢查槍頭密封性。
3，反應液蒸發。 用封板膜密封酶標板。
4，洗板不徹底。 足夠的洗滌次數和加入足量洗滌液。
5，孔底有異物。 讀數前清潔板底。
可能原因 解決措施是
1，試劑反應不充分 確保孵育時間并按推薦溫度孵育
2，試劑體積添加不足 檢查移液器并嚴格按照操作步驟操作
3，稀釋不正確 檢查試劑稀釋步驟
4，酶結合物失活 混合酶結合物和底物，通過顯色反應檢查
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