血鈣幾乎全部存在于血漿中，所以血鈣主要指血漿鈣。血漿鈣有離子鈣和結合鈣兩種形式，其中只有離子鈣 直接起生理作用，它與結合鈣處于動態平衡，并受血液pH的影響。血鈣水平與多種重要的生理功能相關，過高或過低都會影響正常生理功能。本試劑盒提供了一種簡單的方法來檢測血液中游離鈣濃度，其原理是在強堿溶液中游離鈣與GBHA反應生成紅色鈣-GBHA復合物，在520nm有吸收峰；通過測定520nm吸光度，計算游離鈣濃度。
酶標儀或可見分光光度計（能測520nm處的吸光度）及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
無水甲醇、丙酮、去離子水
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答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現多條帶，建議查閱文獻或進行生物信息學分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大小；
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體；
5、抗體孵育時間過久，建議減少抗體孵育時間；
6、二抗與抗原有交叉反應，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質變性過程及強度；
8、底物顯色與曝光時間過長，建議縮短顯色及曝光的時間。
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