生物體內巰基主要包括谷胱甘肽巰基和蛋白質巰基。前者不僅能夠修復氧化損傷的蛋白質，而且參與活性氧清除，后者對于維持蛋白質構象具有重要作用。通過測定總巰基含量和GSH含量，能夠間接測定蛋白質巰基含量。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法，用于檢測各種生物樣本中總巰基含量，其原理是巰基基團與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應，生成黃色化合物，在412nm處有大吸收峰。在一定的濃度范圍內，總巰基含量與412nm吸光度成線性關系，根據標準曲線，即可計算出樣品中總巰基含量。
酶標儀或可見光分光光度計（能測412nm處的吸光度）及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
制冰機、低溫離心機、去離子水、勻漿器（如果是組織樣本）
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答：如果能夠排除下面的幾個問題，那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強，將底物消耗光；
2、ECL底物中H2O2不穩定，失活；
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置；
4、一抗選擇不當；
5、二抗失活。
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