線粒體呼吸鏈復合體Ⅱ又稱琥珀酸-輔酶 Q 還原酶，廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體中，催化琥珀酸氧化生成延胡索酸，同時輔基 FAD 還原為 FADH2，后者進一步還原氧化型輔酶Q生成還原型輔酶Q，是呼吸電子傳遞鏈的支路。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法，用于檢測生物體內線粒體呼吸鏈復合體Ⅱ活性，其原理是線粒體呼吸鏈復合體Ⅱ的催化產物還原型輔酶Q可進一步還原2,6-二氯吲哚酚，2,6-二氯吲哚酚在605nm有特征吸收峰，通過檢測2,6-二氯吲哚酚的減少速率來計算該酶活性。
酶標儀或紫外分光光度計（能測605nm處的吸光度）及恒溫箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
制冰機、低溫離心機
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
更新中
答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現多條帶，建議查閱文獻或進行生物信息學分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大小；
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體；
5、抗體孵育時間過久，建議減少抗體孵育時間；
6、二抗與抗原有交叉反應，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質變性過程及強度；
8、底物顯色與曝光時間過長，建議縮短顯色及曝光的時間。
Copyright ?湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部備案：鄂ICP備17001029號-1 技術支持：武漢微盟
