
肌酐(creatinine,Cr)是肌肉在人體內代謝的產物,主要由腎小球濾過排出體外。血中的肌酐來源包括外源性和內源性兩部分。外源性肌酐是肉類食物在體內代謝后的產物;內源性肌酐是體內肌肉組織代謝的產物。血肌酐幾乎全部經腎小球濾過進入原尿,并且不被腎小管重吸收;內源性肌酐每日生成量幾乎保持恒定,嚴格控制外源性肌酐的攝入時,血肌酐濃度為穩定值,因此,測定血肌酐濃度可以反映腎小球的濾過功能。本試劑盒提供了一種簡單易用的比色法,用于檢測樣本中肌酐含量。其原理是:肌酐酶可催化肌酐產生肌酸,肌酸酶催化肌酸產生肌氨酸和尿素。肌氨酸在肌氨酸氧化酶的催化下氧化產生過氧化氫,過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替比林偶聯酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。測500nm處的吸光值,即可測定樣品中肌酐含量。

試劑盒組分 | 規格 | 儲存條件 | ||
48T | 96T | |||
提取液 | 10mL | 20mL | 4℃保存 | |
試劑一 | 7.5mL | 15mL | 4℃避光保存 | |
試劑二 | 1 | 1 | -20℃避光保存 | |
試劑三 | 5mL | 10mL | 4℃保存 | |
標準品(10mg肌酐) | 粉劑×1支 | 粉劑×1支 | 4℃保存 | |

酶標儀或可見分光光度計(能測500nm處的吸光度)
恒溫箱、制冰機、低溫離心機
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
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1)對照的設置對于測定結果的可靠性影響很大,尤其是待測液中含有與測定原理中擬直接檢測的產物一樣的物質時。通過設置對照,不僅可以排除本底的影響,而且可以排除其它一些未知的復雜影響,保證測定結果可靠。
(2)首先考慮的是保證測定結果可靠。因此,有些試劑盒只設空白對照,但是有些試劑盒每個樣品都設對照。其中后者是根據反應原理,為了排除可能的復雜影響。
關于設置樣本對照是否造成浪費。首先必須要保證測定結果可靠,因為如果測定結果不可靠,就不可能得到正確結論,那么所有的研究投入,包括前期的樣品培養與處理、購買試劑盒的費用和用戶的時間與精力,都會浪費。為此,我們精心權衡,在必要時每個樣品都設對照。
生化試劑盒初一般是采用分光光度法,用分光光度計測量吸光度。微量法是隨著酶標儀和微孔板的普及,改用酶標儀和酶標板測量吸光度。除了儀器不同以外,主要差別是反應體系更小,一般不超過250ul,計算公式的系數會有一定變化。
d:由比色皿光徑,1cm改為96孔板直徑,0.5 cm(也有0.6cm的)
但對于標明只用分光光度法的試劑盒,不建議使用酶標儀進行酶活性測定。非要用酶標儀進行檢測,一定要按照說明書將反應體系縮小至250微升左右,加樣表中各試劑體積一定要按照比例縮小。不過,因為初研發時是按照分光光度法進行設計和調整的,用戶改變測定儀器后,我們不保證能夠取得好的結果。
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