
脯氨酸是植物體內適應逆境脅迫的一種重要的滲透調節物質。高等植物中脯氨酸代謝因其初始底物不同,分為谷氨酸( Glu) 和鳥氨酸( Orn) 兩條合成途徑。鳥氨酸轉氨酶(δ-OAT) 是以鳥氨酸為前體合成脯氨酸途徑的關鍵酶,對植物適應逆境脅迫起關鍵作用。在動物體內,δ-OAT主要參與尿素循環、脯氨酸代謝及氮平衡調節。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法,用于檢測生物樣本中OAT的活性。其原理是鳥氨酸和α-酮戊二酸在鳥氨酸轉氨酶和NADH作用下發生氨基轉移反應生成吡咯啉-5-羧酸(P5C),同時產生NAD。NADH在340 nm處有特征吸收峰,而NAD沒有,通過檢測340nm處的吸光度的變化可反映出鳥氨酸轉氨酶活性的高低。



酶標儀或紫外分光光度計(能測340nm處的吸光度)及水浴鍋
96孔UV板或微量石英比色皿、可調節式移液槍及槍頭
低溫離心機、制冰機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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生化試劑盒初一般是采用分光光度法,用分光光度計測量吸光度。微量法是隨著酶標儀和微孔板的普及,改用酶標儀和酶標板測量吸光度。除了儀器不同以外,主要差別是反應體系更小,一般不超過250ul,計算公式的系數會有一定變化。
d:由比色皿光徑,1cm改為96孔板直徑,0.5 cm(也有0.6cm的)
但對于標明只用分光光度法的試劑盒,不建議使用酶標儀進行酶活性測定。非要用酶標儀進行檢測,一定要按照說明書將反應體系縮小至250微升左右,加樣表中各試劑體積一定要按照比例縮小。不過,因為初研發時是按照分光光度法進行設計和調整的,用戶改變測定儀器后,我們不保證能夠取得好的結果。
普通酶標板是用來測定反應產物的光吸收峰波長在可見光范圍的生化試劑盒項目的,無法測量反應產物的光吸收峰波長在紫外區域的項目。可見光是電磁波譜中人眼可以感知的部分,可見光譜沒有精確的范圍;一般人的眼睛可以感知的電磁波的波長在400~760nm之間,但還有一些人能夠感知到波長大約在380~780nm之間的電磁波。可見光通常指波長范圍為:390nm-780nm的電磁波。注意:我們看到的其實是反射的光,比如ELISA終止后的黃色,黃光波長為580-595nm,但實際測量的450nm是它的補色。
UV板是紫外板,這些微板有一個獨特的紫外線透明底部,是測定反應產物的光吸收峰波長在紫外區域的理想耗材。紫外光被劃分為A 射線、B 射線和C 射線(簡稱UVA、UVB 和UVC),波長范圍分別為400-315nm,315-280nm,280-190nm
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