
總膽汁酸(Total Bile Acid, TBA)是膽固醇在肝臟分解代謝的產物,由肝臟合成并分泌,是膽汁的主要成分之一是肝臟分泌到膽汁中大的有機酸。膽汁酸參與脂肪的消化、吸收及膽固醇代謝。當肝細胞損傷或膽道阻塞時,會引起膽汁酸代謝障礙,出現血清膽汁酸增高。檢測血液中的總膽汁酸水平(空腹血清)是評估肝膽功能、膽汁代謝狀態的重要指標。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法,用于檢測血清(漿)中總膽汁酸(TBA)的含量。其原理是膽汁酸在3α-羥基類固醇脫氫酶(3α-HSD)的催化下以硫代氧化型輔酶I(S-NAD+)為氫受體,脫氫產生3-酮類固醇,使S-NAD+轉化為硫代還原型輔酶I(S-NADH)。3-酮類固醇在3α-HSD催化以還原型輔酶I(NADH)為氫供體,產生膽汁酸,通過酶循環反應,不斷生成S-NADH,該物質在405 nm處有大吸收峰。在一定的反應時間內,酶循環反應產生的S-NADH與樣本中的膽汁酸濃度成正比,據此可以計算出總膽汁酸含量。



酶標儀或可見分光光度計(能測405nm處的吸光度)
恒溫箱、96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
去離子水
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生化試劑盒初一般是采用分光光度法,用分光光度計測量吸光度。微量法是隨著酶標儀和微孔板的普及,改用酶標儀和酶標板測量吸光度。除了儀器不同以外,主要差別是反應體系更小,一般不超過250ul,計算公式的系數會有一定變化。
d:由比色皿光徑,1cm改為96孔板直徑,0.5 cm(也有0.6cm的)
但對于標明只用分光光度法的試劑盒,不建議使用酶標儀進行酶活性測定。非要用酶標儀進行檢測,一定要按照說明書將反應體系縮小至250微升左右,加樣表中各試劑體積一定要按照比例縮小。不過,因為初研發時是按照分光光度法進行設計和調整的,用戶改變測定儀器后,我們不保證能夠取得好的結果。
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