蛋白印跡膜再生液，用于免疫印跡中轉(zhuǎn)移了蛋白后膜的重復(fù)利用，可對(duì)同一張膜進(jìn)行多次Western Blot檢測(cè)。在免疫印跡中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后，有時(shí)還需要檢測(cè)表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定的內(nèi)參蛋白作為參照，或檢測(cè)其它蛋白進(jìn)行比較。通過(guò)使用蛋白印跡膜再生液中特殊成份解離一抗二抗與印跡膜上抗原的結(jié)合，在不影響抗原蛋白的情況下從而去除一抗二抗，即可非常方便地重新利用同一張膜檢測(cè)其它蛋白。與重新跑SDS-PAGE膠比較，不僅省時(shí)省力，而且可以消除重新上樣而帶來(lái)的誤差，使可比性更強(qiáng)。
本產(chǎn)品僅適用于清除硝酸纖維素膜或PVDF膜上結(jié)合的抗體，不會(huì)影響抗原蛋白。同時(shí)該產(chǎn)品只適用于ECL和類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè)，不適用于非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè)，例如DAB、NBT/BCIP等，所以大家在選擇該產(chǎn)品的時(shí)候一定要記得膜和檢測(cè)方法的要求。
1、蛋白印跡膜再生液使用后應(yīng)該立刻蓋緊蓋子，避免長(zhǎng)時(shí)間和空間接觸導(dǎo)致pH和質(zhì)量改變，影響使用效果。
2、本產(chǎn)品從低溫取出后有時(shí)會(huì)出現(xiàn)SDS低溫析出的現(xiàn)象，建議溫水浴溶解后再使用。
3、蛋白印跡膜再生液有輕度腐蝕性，為了您的安全，請(qǐng)帶乳膠手套操作，如果不小心濺入眼睛，請(qǐng)用大量清水沖洗。本產(chǎn)品使用時(shí)盡量在通風(fēng)櫥中或者密閉盒內(nèi)孵育，避免其刺鼻氣味被人體大量吸入。
4、為了達(dá)到佳效果，推薦使用PVDF膜，本產(chǎn)品對(duì)PVDF膜使用效果更好。
5、適用于ECL和類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western 檢測(cè)。不適用于非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western 檢測(cè)，例如DAB，NBT/BCIP。
6、需要再生的膜如果干了，則洗脫效率非常低，因此如果決定要做膜再生，應(yīng)該做完底物化學(xué)發(fā)光后，立刻將濕潤(rùn)狀態(tài)的膜放入PBS中4℃保存直到開(kāi)始再生過(guò)程，盡量避免讓膜干燥。
7、使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA封閉的膜更容易再生。
8、本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
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答：可能的原因有：
1、膠濃度不對(duì)，不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差，可以調(diào)整濃度；
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度，延長(zhǎng)孵育時(shí)間；
3、酶失活，建議直接將酶和底物進(jìn)行混合，如果不顯色則說(shuō)明酶失活了。選擇在有效期內(nèi)、有活性的酶聯(lián)物；
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體，建議查詢相關(guān)文獻(xiàn)確定；
5、標(biāo)本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低，建議設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照比對(duì)結(jié)果，增加標(biāo)本上樣量。
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