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抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase，TRAP）是破骨細(xì)胞 的標(biāo)志性酶，特異性分布于破骨細(xì)胞中。TRAP染色試劑盒即是用于顯示組織中的破骨細(xì) 胞。其中基本原理在于，在含酒石酸的酸性條件下，抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP能將萘酚 AS-BI磷酸鹽水解，產(chǎn)生的萘酚AS-BI與六偶氮副品紅結(jié)合，形成非水溶性的酒紅色物質(zhì) 沉積在酶活性原位，從而實現(xiàn)對抗酒石酸酸性磷酸酶的顯色和定位。
本產(chǎn)品基本組成成分：反應(yīng)緩沖液主要成分為醋酸緩沖液及酒石酸鉀鈉，pH約5.0；副品 紅溶液，含5%副品紅；亞硝酸鈉溶液主要成分為4%亞硝酸鈉；AS-BI磷酸鹽底物溶液， 主要成分為20 mg/mL萘酚AS-BI磷酸鹽。經(jīng)本產(chǎn)品染色后，破骨細(xì)胞中的TRAP呈酒紅色 ，定位于細(xì)胞漿。按照切片上每個組織點300 μL用量，本試劑盒可以做50次以上TRAP 染色。

配制 TRAP 工作液:
1）取50μL副品紅溶液與50μL亞硝酸鈉溶液在潔凈離心管中混勻，得到六偶氮副品紅 溶液；
2）向第1步的100μL六偶氮副品紅溶液中加入100μLAS-BI磷酸鹽底物溶液， 吹吸數(shù) 次充分；
3）吸取1.8mL反應(yīng)緩沖液加入到第2步的混合液中充分混勻；
4）第3步的混合液經(jīng)針式濾器過濾（0.45μm 水系濾膜）即得到TRAP 工作液。
注意：務(wù)必按照所屬順序配制工作液。每個組織點大約需要200-300μL工作液，根據(jù)使 用量配制，現(xiàn)配現(xiàn)用，避免浪費(fèi)。 石蠟切片操作步驟（供參考）
1.石蠟切片脫蠟至水， 純水洗數(shù)分鐘。
2.將切片用組化筆化圈后放在（加有一定量的防止切片蒸干的純水）濕盒中，用純水37 ℃孵育2h。
3.切片孵育完成后傾去純水，滴加過濾好的TRAP 工作液覆蓋組織，置于37℃避光反應(yīng) 20-30 min。
4.（可選，自備相關(guān)試劑）復(fù)染細(xì)胞核：傾去孵育液并水洗，以蘇木素染液進(jìn)行染核。
5.脫水，透明，以中性樹膠封片。
細(xì)胞爬片操作步驟（供參考）
1.細(xì)胞固定：吸除細(xì)胞培養(yǎng)液，加入4%多聚甲醛（推薦 G1101）固定15-30min，蒸餾水 洗3次。
2.細(xì)胞破膜：以0.2%TritonX-100溶液覆蓋細(xì)胞進(jìn)行破膜處理20-30min，蒸餾水輕洗3 遍。
3.孵育染色：將TRAP 工作液加到細(xì)胞孔板內(nèi)覆蓋細(xì)胞，37℃避光孵育20min，蒸餾水洗 3次。
4.（可選，自備相關(guān)試劑）細(xì)胞核復(fù)染：吸除孵育液并水洗，以蘇木素染液進(jìn)行染核。
5.加入適量無水乙醇脫水，取出孔板中的蓋玻片，吹風(fēng)機(jī)吹干，倒扣在潔凈的載玻片上 以中性樹膠封片。

 1.僅用于科研，不能用于臨床診斷。所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于其他用途。
2.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。