
細胞發生凋亡時, 會激活一些DNA內切酶,這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA,產生180bp-200bp的 DNA 片段,表現為瓊脂糖凝膠電泳中呈現的特異的梯狀Ladder圖譜。基因組DNA雙鏈或單鏈斷裂時會出現產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的催化作用下,與SuperFlour-dUTP結合,從而通過熒光顯微鏡或流式細胞儀直接進行凋亡細胞的檢測,這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法(Terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。Tunel法可以對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,能準確地反應細胞凋亡典型的生物化學和形態特征,可檢測出極少量的凋亡細胞,因而在細胞凋亡的研究中廣泛采用。
本試劑盒應用范圍廣,可用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況,也可檢測培養的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。可選擇性的檢測凋亡細胞,而非壞死細胞或因輻照和藥物治療而造成的 DNA 鏈斷裂的細胞。本試劑盒檢測細胞凋亡,耗時短,只需一步染色反應,洗滌后即可檢測。



PBS 緩沖液(pH~7.4);4%多聚甲醛;牛血清白蛋白 (BSA) 或正常的羊、牛血清;70%乙醇(自選);脫蠟溶劑(石蠟切片樣本)
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答:細胞形態異常可能是由于支原體污染、有毒物質釋放、營養不足等原因引起的。
解決方法有:
1、定期進行支原體檢測,確保細胞無支原體污染;
2、檢查培養基和血清的質量,避免使用過期或劣質的試劑;
3、觀察細胞形態,發現異常及時采取措施,如更換培養基或使用相應的藥物處理;
4、對于有毒物質釋放引起的形態異常,可以嘗試降低細胞密度或更換培養基。
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