脂滴是由磷脂單分子層及甘油三酯(Triglyceride)、膽固醇酯(Cholesteryl ester，CE)組成的中性脂肪(Neutral lipid)疏水核心構成，廣泛存在于動物、細菌、酵母、植物和昆蟲細胞中。脂滴能夠沿著細胞骨架運動，并與其它細胞器相互作用，在脂類代謝與存儲、膜轉運、蛋白降解、以及信號傳導過程中起著重要的作用。多種代謝性疾病，如肥胖、脂肪肝、心血管疾病及糖尿病、中性脂貯存性疾病和Niemann Pick C疾病等，可能都伴隨著脂質貯存的異常。本試劑盒英文名為Lipid Droplets Red Fluorescence Assay Kit with Nile Red，也稱 Nile Red Staining Kit或Red Neutral Lipid Stain，是一種基于熒光探針尼羅紅(Nile Red)來檢測細胞內脂滴(Lipid droplets) 的試劑盒。本試劑盒所使用的熒光探針為尼羅紅(Nile Red)，其在磷脂 (phospho-lipid)中大激發光波長約為552nm，大發射光波長約為636nm，此時為紅色熒光；也可以把激發波長設置為450-500nm，發射波長設置為大于528nm，此時為綠色熒光；但紅色熒光通常比綠色熒光明亮很多。由于Nile Red在紅色熒光時也可以染細胞膜，而在綠色熒光時只染脂滴，所以如果特別關注脂滴的特異性時，也可以設置參數為Ex/Em=485/535nm進行檢測。Nile Red在水和其它極性溶劑中幾乎無任何熒光，一旦與甘油三酯等中性脂肪結合，便發出明亮的紅色熒光(由于其發射光譜范圍廣，也可以設置參數觀察到綠色熒光)。本試劑盒適用于熒光顯微鏡、流式細胞儀、熒光酶標儀等熒光檢測系統。
熒光顯微鏡或流式細胞儀或熒光酶標儀、離心機
細胞培養板、可調節式移液槍及槍頭
PBS
更新中...
答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現多條帶，建議查閱文獻或進行生物信息學分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大??；
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體；
5、抗體孵育時間過久，建議減少抗體孵育時間；
6、二抗與抗原有交叉反應，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質變性過程及強度；
8、底物顯色與曝光時間過長，建議縮短顯色及曝光的時間。
Copyright ?湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部備案：鄂ICP備17001029號-1 技術支持：武漢微盟
