
本制品是把編碼細(xì)菌噬菌體P1 Cre蛋白的質(zhì)粒在大腸桿菌中進行表達(dá)后,經(jīng)多次純化分離而得到的Cre重組酶。本酶無需能量輔助因子,Cre-介導(dǎo)的重組很快在底物與反應(yīng)產(chǎn)物之間達(dá)到平衡。
Cre重組酶是細(xì)菌噬菌體P1的I型拓?fù)洚悩?gòu)酶,催化loxP位點間的DNA進行位點特異性重組。loxP識別元件是一34bp序列,其兩端是兩個13 bp的反向重復(fù)序列,中間是起定向作用的8 bp間隔區(qū)。重組產(chǎn)物根據(jù)loxP位點的位置和相對方向而不同,兩個含單loxP位點的DNA將被融合。兩個正向重復(fù)loxP位點間的DNA將以環(huán)狀形式切割,而兩個反向loxP位點間的DNA序列將被翻轉(zhuǎn)。

1)兩個loxP位點之間DNA的切割;
2)含loxP位點DNA分子的融合;
3)loxP位點之間DNA序列的翻轉(zhuǎn)。


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解決方案:檢查熒光染料和探針質(zhì)量。或增加探針\染料濃度。
解決方案:重新設(shè)計引物或優(yōu)化反應(yīng)體系(如Mg2?濃度)。
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