
該試劑盒采用競爭抑制酶聯(lián)免疫吸附法原理。酶標板預包被親和純化的抗雌二醇(E2)的抗體。將待測抗原(標準品或樣本)和生物素標記的抗原加入到酶標板中,它們對固相抗體進行競爭結合。接著洗滌去除未結合的物質(zhì),加入鏈酶親和素-辣根過氧化物酶(SA-HRP)以形成固相抗體-生物素標記抗原-SA-HRP的復合物。然后,將 TMB 溶液加入孔中并進行孵育,酶促反應產(chǎn)生藍色物質(zhì),加入終止液后,變成黃色。顏色深淺與樣本中待測抗原的含量呈現(xiàn)負相關。在450nm 波長下測定吸光值。后通過建立標準曲線,根據(jù) OD 值來計算樣品中雌二醇(E2)的濃度。



酶標儀(能測 450nm 處的吸光度)
多通道移液器或自動洗板機
恒溫箱、低溫離心機
可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
去離子水
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可能原因 解決措施是
1,試劑反應不充分 確保孵育時間并按推薦溫度孵育
2,試劑體積添加不足 檢查移液器并嚴格按照操作步驟操作
3,稀釋不正確 檢查試劑稀釋步驟
4,酶結合物失活 混合酶結合物和底物,通過顯色反應檢查
可能原因 解決措施是
1,酶標儀設置不正確 檢查儀器波長
2,沒加終止液 加入適量終止液
3,讀板時等待時間太長 及時讀板
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